Antibiograma
Un antibiograma es el resultado de una prueba de laboratorio para determinar la sensibilidad o resistencia de los patógenos microbianos a los antibióticos . El procedimiento de prueba verifica si una bacteria es inhibida en el crecimiento por un antibiótico en una cierta concentración , entonces es sensible ( sensible , a veces también llamado sensible ) a esto o si no hay inhibición del crecimiento, entonces es resistente (resistente). al ingrediente activo. En la jerga médica , este procedimiento de prueba microbiológica también se conoce como prueba de sensibilidad o prueba de resistencia. El término Prueba de susceptibilidad a los antimicrobianos (AST) es común en los países de habla inglesa .
Importancia médica
Se recomienda un antibiograma antes de cualquier terapia con antibióticos. En el caso de infecciones que requieran terapia, el tratamiento debe realizarse en paralelo con la creación de un antibiograma para no retrasar la terapia antibiótica requerida . Mientras no se haya identificado aún el patógeno, se inicia una terapia calculada basada en valores empíricos. Después de la identificación y el resultado del antibiograma, se puede iniciar una terapia dirigida si es necesario. El antibiograma es útil porque ningún antibiótico es eficaz contra todos los patógenos posibles y el riesgo de multi- resistencia de las bacterias clínicamente relevantes es un problema grave.
Prueba de difusión de agar
En la prueba de difusión en agar , a menudo utilizando el método de Kirby Bauer, el microorganismo que se va a examinar se distribuye en pequeñas cantidades en la superficie de un medio nutritivo plano especial y luego el medio nutriente se cubre con placas circulares hechas de material absorbente que contiene varios antibióticos en una cantidad definida. Los antibióticos se disuelven en el medio de cultivo en gel y se difunden radialmente hacia afuera. Cuanto más se difunde el antibiótico de las plaquetas, menor es su concentración. A cierta distancia de las plaquetas, la concentración del antibiótico es tan baja que el microorganismo puede crecer a pesar de la presencia del antibiótico. Después de un tiempo de incubación suficiente para que los microorganismos se multipliquen hasta que el medio nutriente esté visiblemente contaminado (generalmente de 16 a 20 horas para las bacterias patógenas), se miden y evalúan los radios de las zonas de inhibición con respecto a la resistencia o sensibilidad del microorganismo.
Este procedimiento de prueba también se conoce como prueba de difusión en placa porque se lleva a cabo en una placa, más precisamente en una placa de Petri . Para los antibiogramas, que se producen a gran escala en laboratorios de microbiología médica, se dispone de ayudas técnicas, por ejemplo, sellos con los que se pueden aplicar varias plaquetas antibióticas diferentes al medio nutritivo al mismo tiempo.
Método de dilución para determinar el valor de MIC o MBK
La concentración mínima inhibitoria (MIC) es la concentración más baja de un inhibidor a la que todavía se impide la reproducción del microorganismo. La concentración mínima bactericida (MBK), en contraste con la concentración mínima inhibitoria (MIC), es la concentración que es suficiente para matar al 99,9% de los individuos del microorganismo analizado. Estos tamaños no pueden determinarse con tanta precisión mediante la prueba de difusión en agar descrita, para ello se utiliza una prueba de dilución .
Método de microdilución
Con el método de microdilución (latín: diluere , "diluir"), el microorganismo a examinar se suspende en un medio nutritivo líquido ( caldo ). A esto se le añade una cantidad definida de antibiótico. Si esto se hace con diferentes concentraciones del antibiótico, p. Ej. B. con una serie de diluciones (1, 2, 4, 8, 16, 32 mg / L), se puede realizar una determinación de la CIM, que es más precisa que la determinación de la sensibilidad con la prueba de difusión en agar. La multiplicación del microorganismo puede reconocerse por la turbidez del medio nutriente: si permanece claro, el microorganismo examinado es sensible a este antibiótico en esta concentración. La concentración más baja (dilución más alta) a la que se produce la inhibición proporciona el valor de MIC. El método de microdilución se utiliza cuando el proceso se lleva a cabo con pequeños volúmenes, p. Ej. B. se lleva a cabo en una placa de microtitulación . Si se utilizan volúmenes más grandes, como en tubos de cultivo , se habla de manera más general de la prueba de dilución en caldo.
Determinaciones de resistencia automatizadas
Existen varios dispositivos que realizan una determinación de la resistencia a los antibióticos. Estos dispositivos funcionan según el método de microdilución con placas de microtitulación. Los dispositivos (lectores de placas) también asumen la lectura de los resultados de la medición con la ayuda de métodos de medición fotométricos . El software que pertenece a los dispositivos evalúa los resultados y comprueba su plausibilidad . Ejemplos de tales dispositivos de laboratorio automatizados son:
- VITEK de bioMérieux
- Phoenix de Becton Dickinson
evaluación
La evaluación se basa en estándares seleccionados, por ejemplo
Procedimientos de prueba adicionales
Un caso especial de antibiograma es la prueba epsilometer (E-test), que también se puede utilizar para determinar la concentración mínima inhibitoria, aunque el método se basa en la prueba de difusión en agar.
Al investigar los principios activos de los antibióticos, también se puede realizar una prueba para determinar su espectro de efectos sobre los microorganismos. Para este propósito, el antibiótico se aplica en el centro de la superficie del medio nutriente, por ejemplo, en una placa de filtro, y varios organismos indicadores se esparcen radialmente sobre él. Después de la incubación , se puede reconocer una inhibición por el hecho de que la línea de vacunación no está completamente cubierta por el antibiótico. Por tanto, el antibiótico actúa sobre el organismo indicador asociado, que es sensible.
enlaces web
- Entrada sobre antibiograma en Flexikon , una Wiki de la empresa DocCheck
- Levaduras antibiograma. En: Laborlexikon . Consultado el 12 de marzo de 2018 .
Evidencia individual
- ↑ a b c Michael T. Madigan, John M. Martinko, Jack Parker: Brock Mikrobiologie. Traducción alemana editada por Werner Goebel, 1ª edición. Spektrum Akademischer Verlag GmbH, Heidelberg / Berlín 2000, ISBN 3-8274-0566-1 , págs. 966-968.
- ^ A b c Herbert Hof, Rüdiger Dörries: Serie dual: Microbiología médica . 3. Edición. Thieme Verlag, Stuttgart 2005, ISBN 978-3-13-125313-2 , pág. 11-12, 289-296 .
- ↑ Marianne Abele-Horn: Terapia antimicrobiana. Soporte de decisiones para el tratamiento y profilaxis de enfermedades infecciosas. Con la colaboración de Werner Heinz, Hartwig Klinker, Johann Schurz y August Stich, 2ª edición revisada y ampliada. Peter Wiehl, Marburg 2009, ISBN 978-3-927219-14-4 , págs. 260-267 ( terapia antimicrobiana de patógenos específicos según un antibiograma ).
- ^ A b Hans G. Schlegel, Christiane Zaborosch: Microbiología general . 7ª edición. Thieme Verlag, Stuttgart / Nueva York 1992, ISBN 3-13-444607-3 , pág. 364-367 .